Metabolizm ludzkich fibronektyn.

Zachowanie metaboliczne fibronektyny (Fn), wysoce adhezyjnej glikoproteiny (440 000 mol), badano u ośmiu zdrowych osób z grupy kontrolnej oraz u 11 pacjentów, z których sześciu było krytycznie chorych. Fn oczyszczono ze świeżego ludzkiego osocza, znakowano radioizotopem i wykazano, że zachowuje on funkcję zarówno in vitro, jak i in vivo. Wyniki pokazały, że w normalnych kontrolach Fn jest szybko katabolizowanym białkiem z ułamkową wartością szybkości katabolicznej (FCR) wynoszącą 4,8...

Nieprawidłowy metabolizm miedzi i niedobór aktywności oksydazy lizylowej w dziedzicznym zaburzeniu tkanki łącznej.

Nieprawidłowości biochemiczne badano u dwóch braci z przeponami pęcherza moczowego, przepuklin pachwinowych, nieznacznym zwiotczeniem skóry i nadwzrocznością oraz nieprawidłowościami szkieletowymi, w tym egzostozami potylicy. Aktywność oksydazy lizylowej była niska w pożywce hodowanych fibroblastów skóry, czemu towarzyszy zmniejszona konwersja nowo syntezowanego kolagenu do postaci rozpuszczalnej. Stężenie miedzi było znacznie podwyższone w hodowanych fibroblastach skóry, ale zmniejsz...

Zwiększone ilości poliamin mogą obniżyć produkcję interleukiny 2 w reumatoidalnym zapaleniu stawów.

Poliaminy zmniejszają reaktywność immunologiczną. RA jest związane ze zmniejszoną produkcją IL 2. W tym badaniu przedstawiamy dowody sugerujące, że nadmierne poliaminy mogą przyczyniać się do niedoboru IL 2 w RA. Blokowanie wytwarzania poliaminy za pomocą inhibitorów dekarboksylazy ornityny prowadzi do zwiększonej produkcji IL 2 przez PBMC RA. Ponadto, inhibitory oksydazy poliaminowej (PAO) i katalazy również zwiększają wytwarzanie IL 2 przez PBMC RA. Ten efekt hamowania PAO jest zale...

Stabilne rodniki nitroksydowe chronią kardiomiocyty przed uszkodzeniami oksydacyjnymi.

Ochronne działanie stabilnych rodników nitroksydowych na uszkodzenia oksydacyjne badano za pomocą hodowli kardiomiocytów otrzymanych od nowonarodzonych szczurów. Jednowarstwowe kardiomiocyty poddano ekspozycji na H2O2 i określono wpływ na spontaniczne pobudzenie i wyciek LDH. Nadtlenek wodoru nieodwracalnie blokował rytmiczne bicie i powodował znaczące uszkodzenie błony, jak wykazano przez uwalnianie LDH. Urazowi zapobiegała katalaza, która usuwa H2O2 i przepuszczalne dla komórek czynniki c...

Najnowsze zdjęcia w galerii e-gastrolog:

Interleukina 1 stymuluje wytwarzanie czynnika aktywującego płytki krwi w hodowanych ludzkich komórkach śródbłonka.

Stwierdzono, że interleukina 1 pochodząca z monocytów (IL-1) jest silnym induktorem czynnika aktywującego płytki (PAF) w hodowanych ludzkich komórkach śródbłonka naczyniowego (HEC). Produkt zidentyfikowano jako PAF poprzez jego zachowanie w układach chromatograficznych, odzyskanie aktywności biologicznej i jego właściwości fizyko-chemiczne oraz podatność na lipazy. Odpowiedź HEC na IL-1 była zależna od stężenia, stała się bardziej widoczna po upływie 2 godzin i zmniejszona po 18 g...

Naturalne autoprzeciwciała mysie i konwencjonalne przeciwciała wykazują podobne poziomy antygenowej reaktywności krzyżowej.

Komórki B śledziony od myszy normalnych i autoimmunologicznych przenoszono do biorców xid kompatybilnych z MHC. Przeciwciała monoklonalne były wydzielane przez przeniesione komórki B w hodowlach fragmentów śledziony. Przeciwciała te oceniano pod kątem reaktywności i reaktywności krzyżowej wobec panelu sześciu autoantygenów i dwóch konwencjonalnych antygenów przy użyciu testu ELISA. Autoprzeciwciała i konwencjonalne przeciwciała wytwarzane w hodowlach fragmentów śledziony przez norma...

Naczyniowy transport insuliny do mięśnia sercowego szczura. Centralna rola śródbłonka naczyń włosowatych.

Wykorzystując nienaruszone, bijące serca, oceniliśmy oddziaływanie insuliny ze śródbłonkiem naczyń włosowatych i późniejsze pojawienie się insuliny w mięśniu sercowym. Serca szczurów perfundowano insuliną 125I (10 (-10) M) samodzielnie lub w połączeniu z nieznakowaną insuliną (10 (-9) -10 (-5) M). Ziarno 125I (pokazane jako stanowiące ponad 90% nietkniętej insuliny) nad zarówno kapilarnym śródbłonkiem, jak i mięsień sercowy zmniejszyły się w sposób zależny od dawki, gdy se...

Terapeutyczne stężenia glukokortykoidów hamują aktywność przeciwbakteryjną człowieka

Poprzez eksponowanie ludzkich makrofagów krwiopochodnych i makrofagów pęcherzykowych in vitro na deksametazon, wykazaliśmy w tych badaniach, że glukokortykoidy znacząco hamują aktywność przeciwdrobnoustrojową makrofagów, ale nie aktywują makrofagów przez limfokiny. Już tylko 2,5 X 10 (-8) mol / litr deksametazonu zapobiegło makrofagom zahamowania kiełkowania zarodników Aspergillus lub eliminacji połkniętych bakterii, takich jak Listeria, Nocardia lub Salmonella. Uszkodzenie funkcji mak...

Wykrywanie częstego polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych w locus ludzkiego beta receptora antygenowego komórek T. Potencjalne narzędzie diagnostyczne.

Nieprawidłowa funkcja limfocytów T jest cechą spektrum dziedzicznych i nabytych chorób. Wykryliśmy częsty polimorfizm długości fragmentów restrykcyjnych w locus ludzkiego łańcucha beta receptora komórek T, który może pomóc w analizie tych zaburzeń. Badanie panelu 18 normalnych osobników, testujących obecność polimorfizmu, wykazało, że stanowi on 36% alleli w tej grupie. Biorąc pod uwagę fakt, że locus łańcucha beta receptora komórek T został zmapowany do chromosomu 7 i że at...

Protoporfiria erytropoetyczna. Fotoaktywacja układu dopełniacza.

Układ dopełniacza analizowano u 14 bezobjawowych pacjentów z protoporfirią erytropoetyczną. W większości badanych surowic poziomy składników dopełniacza C1, C4, C2 i C3 mieściły się w zakresie prawidłowym. Po napromieniowaniu próbek surowicy in vitro promieniowaniem ultrafioletowym (330-460 nm) zaobserwowano wyraźny spadek całkowitej aktywności hemolitycznej, któremu towarzyszyła redukcja poziomów C1, C4, C2 i C3. Utratę całkowitej aktywności hemolitycznej można bezpośrednio pow...

Retargetowanie komórek przez bispecyficzne przeciwciała monoklonalne. Dowód pominięcia wrażliwości śródpiersia na lizę komórek w czerniaku ludzkim.

Nieleczność wewnątrzmaciczna pod względem podatności na lizę cytotoksycznych limfocytów T (CTL) stanowi główną przeszkodę w immunoterapii adoptywnej nowotworów. Aby pokonać heterogenność obserwowaną pod względem podatności komórek docelowych na lizę komórkową, w tym badaniu wykorzystano dwa oczyszczone bispecyficzne przeciwciała monoklonalne (bsmAbs), które rozpoznają cząsteczki ekspresjonowane przez cytotoksyczne komórki efektorowe (cząsteczki receptora CD3 i IgG Fc), jak ró...

Aktywacja przepuszczalnych dla Ca kanałów kationowych przez przeciwciało związane z zapaleniem mięśnia sercowego w miocytach komorowych świnek morskich.

Patogeneza zapalenia mięśnia sercowego i kardiomiopatii rozstrzeniowej obejmuje jednak procesy autoimmunologiczne i przeciążenie mięśnia sercowego mięśnia sercowego. Surowice zawierające przeciwciała anty-serce związane z mysim modelem zapalenia mięśnia sercowego zwiększyły [Ca2 +] i w miocytach komory gwinejskiej tylko w obecności pozakomórkowego Ca2 +. Przeciwciała z dodatnim przeciwciałem, aktywowane surowicą Ca (2 +) - przepuszczalne kanały kationowe, które były niewrażliwe na...

Trwałe wadliwe sprzęganie receptorów dopaminy-1 z białkami G po solubilizacji z proksymalnych kanalików nerki u szczurów z nadciśnieniem.

Natriuretyczne działanie agonistów dopaminy-1 (DA-1) jest zmniejszone u szczurów z samoistnym nadciśnieniem (SHR), częściowo z powodu wadliwego sprzężenia z cyklazą adenylanową receptora DA-1 (AC) w kanalikach proksymalnych w kanalikach proksymalnych. W celu zbadania tego wadliwego sprzężenia, receptory dopaminy DA-1 z kanalików proksymalnych nerki solubilizowano i rekonstytuowano w pęcherzyki fosfolipidowe. Wiązanie selektywnego ligandu DA-1 [125I] SCH 23982 było specyficzne i nasycalne,...

Oczyszczanie i częściowe sekwencjonowanie autoantygenu RA33 wykazuje, że jest on nie do odróżnienia od białka A2 heterogennego kompleksu jądrowego rybonukleoproteiny.

RA33 jest autoantygenem jądrowym o pozornej masie cząsteczkowej 33 kD. Autoprzeciwciała przeciwko RA33 występują w około 30% surowic od pacjentów z RA, ale tylko sporadycznie w surowicach od pacjentów z innymi chorobami tkanki łącznej. Aby scharakteryzować RA33, antygen oczyszczono z ekstraktów jądrowych komórek HeLa do uzyskania ponad 90% homogenności za pomocą chromatografii powinowactwa na heparynie-Sepharozie i przez chromatoogniskowanie. Analiza sekwencji pięciu peptydów tryptyczny...

Identyfikacja ludzkiego epitopu specyficznego w konserwatywnym regionie autoantygenu La / SS-B.

Wiadomo, że ludzkie autoprzeciwciała anty-La / SS-B reagują z wysoce konserwatywnymi epitopami sugerowanymi jako miejsca funkcjonalne lub aktywne na polipeptydzie La / SS-B. To badanie zaprojektowano w celu określenia, czy autoprzeciwciała reagują również ze słabo konserwowanymi regionami La / SS-B, jak przewidziano w odpowiedzi autoimmunologicznej opartej na antygenie. Wiązanie ludzkich autoprzeciwciał z oczyszczonymi ludzkimi, mysimi i bydlęcymi rekombinowanymi fragmentami reprezentującymi...

Indukowane światłem uwalnianie protoporfiryny z erytrocytów w protoporfirii erytropoetycznej.

Fotofolizy normalnych erytrocytów inkubowanych z protoporfiryną zmniejsza się w obecności albuminy. Gdy globina jest dodawana do normalnych erytrocytów zawierających protoporfirynę, protoporfiryna jest związana z globiną. Podczas napromieniania protoporfiryna przemieszcza się z globiny do błony erytrocytów i inicjowana jest fotohemoliza. Erytrocyty u pacjentów z protoporfirią erytropoetyczną zawierają duże ilości protoporfiryny związanej z hemoglobiną. Po napromieniowaniu tych komóre...

Lipoproteina małpy Rhesus (a) wiąże się słabiej niż lizyna Sepharose i U937 z komórkami monocytoidalnymi niż ludzka lipoproteina (a). Dowód na dominującą rolę kringle 4 (37).

Lipoproteina rezusa (a) (Lp [a]) wiąże się mniej wydajnie niż ludzka Lp (a) z lizyną-Sepharose i hodowanymi komórkami U937. Badania z wykorzystaniem fragmentów plazminogenu pochodnych elastazy wykazały, że w tych interakcjach nie wymaga ani kringle 5, ani domeny proteazy Lp (a), co wskazuje na zaangażowanie regionu K4. Porównawcze analizy strukturalne zarówno ludzkiej, jak i małpiej apo (a) domeny K4, wraz z badaniami modelowania molekularnego, poparły wniosek, że K4 (37) odgrywa dominują...

Hemoglobina NYU, wariant z łańcuchem delta,? 2? 212Lys

Niewielki składnik hemoglobiny (Hb) o właściwościach elektroforetycznych łańcucha a-wariantu Hb A2? napotkano w dwóch niepowiązanych rodzinach pochodzenia rosyjsko-żydowskiego. Ten niewielki składnik, oznaczony jako Hb NYU, okazał się wynikać z substytucji lizyny dla asparaginy przy a12. Potwierdziliśmy badania innych na temat hemoglobiny A2? wyizolowany z hemoglobiny niektórych afrykańskich osobników, wynika z zastąpienia normalnej glicyny w pozycji 16 przez argininę. Tak więc dla in...

Mutacja genu fumarase u dwojga rodzeństwa z postępującą encefalopatią i niedoborem fumarazy.

Zgłaszamy wrodzony błąd cyklu kwasu trójkarboksylowego, niedobór fumarazy, u dwojga rodzeństwa urodzonego przez rodziców pierwszego kuzyna. Przedstawiono postępującą encefalopatię, dystonię, leukopenię i neutropenię. Zwiększenie mleczanu w płynie mózgowo-rdzeniowym i wysokie wydalanie fumaranu z moczem doprowadziło nas do zbadania aktywności łańcucha oddechowego i cyklu Krebsa, a także do ostatecznego zidentyfikowania niedoboru fumaraz u tych dwojga dzieci. Niedobór był głęboki ...

Szlaki przetwarzania prekursora gastryny w błonie śluzowej szczura.

Prekursor gastryny hormonu stymulującego wydzielanie kwasu powoduje powstanie wielu peptydów różniących się znacznie pod względem aktywności biologicznej, ale odpowiednie szlaki biosyntezy są słabo poznane. Zastosowaliśmy przeciwciała przeciwko amidowanym gastrynom, gastrynom z końcowymi C-końcowymi gastrynami glicynowymi (Gly) z hydroksyglicyną na końcu COOH (GlyOH) i końcem COOH progastryny, do immunoprecypitacji peptydów znakowanych [35S] siarczanem lub [3H] tyrozyny podczas inkubacj...

Przewlekła blokada syntezy tlenku azotu u szczura powoduje nadciśnienie układowe i uszkodzenie kłębuszków nerkowych.

Tonalne podstawowe uwalnianie tlenku azotu (NO) przez komórki śródbłonka naczyń kontroluje ciśnienie krwi (BP) w stanie podstawowym. W badaniach tych badano wpływ przewlekłego hamowania podstawowej syntezy NO u szczura przez okres 2-mo. Znaczące nadciśnienie układowe rozwinęło się na chronicznie blokowanych NO szczurach w porównaniu do kontroli. Obserwowano także zwężenie tętnic nerkowych przy podwyższeniu ciśnienia kłębuszkowego (PGC) i obniżeniu współczynnika ultrafiltracji k...

Dziedziczna tyrozynemia typu I. Samoczynna korekcja wady fumaryloacetonazy.

Dwóch norweskich pacjentów z przewlekłą tyrozynemią typu I wykazało> 50% aktywności resztkowej fumaryloacetoksyzy w próbkach wątroby pobranych podczas przeszczepienia wątroby. Charakterystyki enzymatyczne obu pacjentów były porównywalne z cechami normalnej kontroli. Immunohistochemia na skrawkach wątroby od tych pacjentów i od trzech innych norweskich pacjentów z tyrozynemią ujawniła mozaikę immunoreaktywności fumaryloacetailazy odpowiadającej całkowicie lub częściowo niektóry...

Defekt biosyntezy mitochondrialnego acetyloacetylo-koenzymu A-tiolazy w hodowanych fibroblastach od chłopca z niedoborem 3-ketotiolazy.

Etiologię niedoboru 3-ketotiolazy przypisano defektowi mitochondrialnej tioazy acetoacetyl-CoA, ponieważ aktywność tiolazy acetoacetyl-CoA w pokrewnych materiałach nie jest aktywowana przez K +, właściwość charakterystyczną dla tego enzymu. Przebadaliśmy białko enzymatyczne i biosyntezę mitochondrialnego tioazolu acetoacetyl-CoA, stosując hodowane fibroblasty skóry u 5-letniego chłopca z niedoborem 3-ketioliolozy. Następujące wyniki zostały osiągnięte, (a) Aktywacja aktywności tiola...

Ekspresja czynnika stymulującego kolonię makrofagów i genów c-fms w ludzkich ostrych komórkach białaczki mieloblastycznej.

Czynnik stymulujący wzrost kolonii makrofagów (CSF-1; M-CSF) jest czynnikiem wzrostu niezbędnym do wzrostu i różnicowania jednojądrzastych fagocytów. W oddziaływaniu CSF-1 pośredniczy wiązanie ze specyficznymi receptorami powierzchniowymi o wysokim powinowactwie kodowanymi przez gen c-fms. Ekspresję genu CSF-1 i c-fms badano w świeżych ludzkich ostrych mieloblastycznych komórkach białaczkowych za pomocą hybrydyzacji Northern blot przy użyciu sond cDNA. Transkrypty CSF-1 o wielkości 4,0 ...

Wsparcie hodowanych hepatocytów przez żel bogaty w lamininę. Dowód na funkcjonalnie istotną macierz podśródbłonkową w normalnej wątrobie szczura.

Przestrzeń podśródbłonkowa prawidłowej wątroby szczura zawiera białka składowe blaszki podstawowej, co oceniono na podstawie badań immunohistochemicznych przekrojów tkanek. Jednak nie wiadomo, czy białka te stanowią kompleks wpływający na czynność wątroby. Zbadaliśmy to pytanie, stosując normalne hepatocyty szczurze hodowane na podłożach białek macierzy jako model interakcji między komórkami i blaszką podstawną in vivo. W hodowlach na podłożu kolagenowym typu I wydzielanie alb...

Rodzinna kardiomiopatia przerostowa jest genetycznie heterogenną chorobą.

Wykazujemy, że rodzinna przerostowa kardiomiopatia (FHC), autosomalne dominujące zaburzenie mięśnia sercowego, jest genetycznie heterogenną chorobą. Miejsce odpowiedzialne za FHC u członków jednego dużego pokolenia zostało niedawno zmapowane na chromosomie 14q11-12 (FHC-1). Scharakteryzowaliśmy trzy dodatkowe niespokrewnione rodziny, w których gen FHC oddziela się jako autosomalna dominująca cecha, aby określić, czy te loci chorobowe są również mapowane na FHC-1. Wszyscy członkowie ro...

Nieprawidłowość lipoproteinowa w chorobie Tangier: ilościowe oznaczanie apoprotein.

W tym badaniu ustaliliśmy na podstawie testu radioimmunologicznego i podwójnej immunoelektroforezy całkowite ilości i rozkłady apoprotein A u trzech dorosłych pacjentów dotkniętych chorobą Tangier (dziedziczny niedobór alfa-lipoprotein). W porównaniu z prawidłowym osoczem, całkowite ilości apoprotein AI i A-II w osoczu Tangeru określono jako mniejsze niż 1% i 5-7%, odpowiednio. U pacjentów z Tangeru około 90% AI apoproteiny osiadło, gdy ultrawirowanie osocza przeprowadzono przy gęsto...

Rola grasicy w indukcji i przeniesieniu szczepień przeciwko adiuwantowemu zapaleniu stawów za pomocą linii limfocytów T u szczurów.

Adjuwantowe zapalenie stawów jest eksperymentalną chorobą szczurów indukowaną przez immunizację do antygenów Mycobacterium tuberculosis. Nasza obserwacja, że zapalenie stawów może być indukowane na napromieniowanych szczurach przez linię A2 limfocytów T przy braku antygenów prątkowych sugeruje, że adiuwantowe zapalenie stawów jest chorobą autoimmunologiczną. Co więcej, linia A2 mogłaby być użyta do szczepienia szczurów, które nie zostały poddane napromieniowaniu, przeciwko póź...

Angioplastyka balonowa wzmacnia ekspresję receptorów angiotensyny II AT1 w neointimy aorty szczura.

Angiotensyna II jest wazoaktywnym peptydem i może działać jako czynnik wzrostu w komórkach mięśni gładkich naczyń. Eksperymentalne uszkodzenie aorty szczura powoduje szybką migrację przyśrodkowych komórek mięśni gładkich i ich proliferację, co powoduje tworzenie się nowych błon wewnętrznych. Zbadaliśmy, stosując autoradiografię ilościową, ekspresję podtypów receptora angiotensyny II AT1 i AT2 oraz enzymu konwertującego angiotensynę w neointimy powstałej w aorcie piersiowej sz...

Układ białkowy stymulujący adypsynę i acylację oraz regulacja wewnątrzkomórkowej syntezy triglicerydów.

Wcześniej charakteryzowaliśmy aktywność ludzkiego osocza, która znacząco stymuluje syntezę triglicerydów w hodowanych fibroblastach ludzkiej skóry i ludzkich adipocytach. Na podstawie jego aktywności in vitro nazwaliśmy aktywne białko stymulujące acylację (ASP). Określono molekularną tożsamość aktywnego składnika surowicy. Analiza sekwencji NH2-końcowych, spektroskopia masowa jonowo-natryskowa i analiza składu aminokwasowego wskazują, że aktywne oczyszczone białko jest fragmentem...

Niedobór kości u szczurów z wyciętymi jajnikami. Funkcjonalny wkład populacji komórek podścieliska szpiku kostnego i wpływ doustnego leczenia dihydrotachysterolem.

W tym badaniu badano proliferacyjną i osteogenną rolę komórek zrębowych szpiku kostnego / osteoprogenitorów w rozwoju deficytu kory kostnej u samic szczurów z wyciętymi jajnikami (OVX). In vitro, klonalny wzrost komórek zrębowych szpiku od szczurów OVX był znacząco upośledzony (w porównaniu z kontrolami pozorowanymi). Jednak w warunkach in vivo, komórki szczurów i szczurów OVX miały równy potencjał kościotwórczy w kilku sytuacjach eksperymentalnych in vivo, takich jak w komórkach ...

Zapalenie kłębuszków nerkowych indukowane u królika przez przeciwciała przeciwdepolarne.

W kłębuszkach królika badano wpływ interakcji między śródbłonkowym enzymem konwertującym angiotensynę (ACE) a kozim anty-króliczym ACE (GtARbACE). Przez immunofluorescencję ACE nie było wykrywalne w normalnych kłębuszkach nerkowych. Jednakże, gdy nerki poddawano perfuzji przeciwciałami GtARbACE, kłębuszkowe związane IgG były siedmiokrotnie wyższe niż IgG nie-immunologiczne, a złogi ziarniste IgG kozich znaleziono na śródbłonku kłębuszków i tętnic. Króliki wstrzyknięte do...

Nieznaczny antygen zgodności tkankowej HY ulega ekspresji na ludzkich hematopoetycznych komórkach progenitorowych.

Polimorficzne pomniejsze transplantacyjne antygeny prawdopodobnie odgrywają ważną rolę we wszczepianiu odrzucanych przeszczepów szpiku kostnym za pośrednictwem układu immunologicznego. Mapowanie tych antygenów na hematopoetycznych komórkach progenitorowych (HPC) jest ważne, ponieważ te determinanty antygenowe mogą służyć jako struktury docelowe w procesie odrzucania, a ostatecznie otwiera możliwość dopasowania do tych antygenów. Zastosowanie cytotoksyczności komórkowej z cytotoksyczn...

Pancytopenia jako zaburzenie klonalne multipotencjalnej hematopoetycznej komórki macierzystej.

Hematopoezę badano u 14-letniej dziewczynki, która miała 2-letnią historię stabilnej bezobjawowej pancytopenii i która była również heterozygotyczna w miejscu strukturalnym dla dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej (G-6-PD). Nie było dowodów morfologicznych ani cytogenetycznych na obecność preleukemii ani sugestii anemii Fanconiego. W limfocytach T z owłosionymi erytrocytami skóry i owcy stosunek aktywności G-6-PD A / B wynosił 1: 1. Jednak tylko aktywność typu B stwierdzono w erytrocyt...

Identyfikacja nowej klasy indukowalnych receptorów na płytkach krwi. Trombospondy oddziałują z płytkami krwi poprzez mechanizm niezależny od GPIIb-IIIa.

Trombospondyna z fibrynogenem, fibronektyną i czynnikiem von Willebranda wiąże się z płytkami krwi stymulowanymi agonistami i wspiera funkcje płytek krwi. Receptory dla tych ostatnich trzech białek są związane z glikoproteiną błonową GPIIb-IIIa. Płytki trombastenowe z niedoborem GPIIb-IIIa zostały wykorzystane do zbadania roli tego białka błonowego w oddziaływaniach trombospondyny z płytkami krwi. Radiojodowana trombosponina wiąże się ze stymulowanymi trombiną płytkami krwi od zdro...

Autoprzeciwciało z komórek T antyhelpera w nabytej agammaglobulinemii.

Pacjent z nabytą agammaglobulinemią miał antyhelpowy czynnik limfocytów T, który został zidentyfikowany jako immunoglobulina z klasy IgG. Czynnik specyficznie związany z podzbiorem komórki TH2-T i, w obecności dopełniacza, zlikwidował efekt pomocniczy normalnych limfocytów T. Przeciwciało limfocytów T antyhelper poprzedziło kilkuletnie pojawienie się limfocytów T supresyjnych TH2 + Ia +, w którym to czasie przebieg kliniczny gwałtownie się pogarszał. Plazmafereza skutkowała limfocyt...

Bezpośrednie zapisy temperatury w drzewie tracheoskronowym u normalnego człowieka.

W celu ustalenia, jak głęboko wdychane powietrze może przedostać się do dróg oddechowych przed doprowadzeniem do warunków ciała, zmierzyliśmy temperaturę w drogach oddechowych przedniego odcinka podstawnego prawego dolnego płata u pięciu normalnych osobników, podczas gdy oni oddychali powietrzem w temperaturze poniżej zera i warunki otoczenia. Podczas spokojnego oddychania większość ogrzewania dostarczanego gazu odbywała się w górnych drogach oddechowych zgodnie z oczekiwaniami. Jedna...

Lokalizacja miejsca rekombinacji w tworzeniu genu globiny Lepore Boston.

Miejsce skrzyżowania sekwencji genów delta i beta-globiny, w wyniku których powstało geny globiny Lepore Boston, zlokalizowano na poziomie DNA. Sondy specyficzne do wykrywania sekwencji interweniujących (IVS) genów delta i beta-globiny zastosowano do mapowania pochodzenia komórkowych fragmentów DNA pacjenta homozygotycznego względem hemoglobiny Lepore Boston. Analiza endonukleazy restrykcyjna i hybrydyzacja tego DNA z sondami swoistymi dla IVS pokazują, że większość, jeśli nie wszystkie, d...

Fibrinogen St. Louis: Nowy dziedziczny wariant fibrynogenu, kojarzony przypadkowo z hemofilią A

Okazało się, że pacjent z klasyczną hemofilią (niedoborem czynnika VIII) ma nowy nieprawidłowy fibrynogen (fibrynogen St. Louis). Inni członkowie rodziny wykazywali tylko defekt. Fibrinogen St. Louis został odziedziczony jako autosomalny dominant i nie był związany z krwawieniem klinicznym. W porównaniu z normalnym fibrynogenem stwierdzono, że fibrynogen St. Louis wykazuje wadliwą polimeryzację fibryny i prawdopodobnie wolniejsze uwalnianie fibrynopeptydów. Przedłużone czasy trombiny cz...

Wada w regulacji ekspresji genu II klasy kompleksu głównych tkanek w ludzkich negatywnych limfocytach HLA-DR od pacjentów z zespołem złożonych niedoborów odporności.

Pacjenci z autosomalnym recesywnym połączonym niedoborem odporności charakteryzują się HLA-ujemnym fenotypem aktywowanych limfocytów T i B. Aby określić molekularne podstawy tego zespołu, zbadaliśmy biosyntezę antygenów klasy I i II oraz ekspresję odpowiednich genów u tych pacjentów. Synteza ciężkiego łańcucha HLA A, B i C jest znacznie zmniejszona, podczas gdy mikroblobulina beta 2 jest wytwarzana w normalnych ilościach. Biosynteza łańcucha alfa i łańcucha alfa HLA-DR jest znoszo...

Zmniejszona wrażliwość artesunatu i chlorochiny Plasmodium falciparum infekującego hemoglobinę H i / lub erytrocytów w stałej stałej hemoglobiny.

Plasmodium falciparum infekujące hemoglobinę hemoglobiny (Hb) H i / lub Hb stałej krwinek czerwonych in vitro było stosunkowo bardziej oporne niż zakażenie normalnych erytrocytów artesunatem i chlorochiną, podczas gdy wrażliwość na pirymetaminę pozostała niezmieniona. Stężenia hamujące o 50% (IC50) dla artesunianu w HbH (alfa-thal 1 / alpha-thal 2), HbH (alfa-thal 1 / Hb Constant Spring) i homozygotycznych erytrocytach Hb z Constant Spring wynosiły 4,5 +/- 2,8, 8,5 +/- 3,2 i 2,6 +/- 1,6 ...

Przechowywanie płytek krwi powoduje redystrybucję cząsteczek glikoproteiny Ib. Dowody na dużą pulę wewnątrz płytkową glikoproteiny Ib.

Glikoproteina błony komórkowej (GP) Ib zawiera receptor dla czynnika von Willebranda i trombiny. Jego proteolityczny fragment, glikokalicyna, krąży w normalnym osoczu. W tym badaniu przechowywanie koncentratów płytek przez 5 dni spowodowało zwiększenie glikokalicyny w osoczu o 221% (1,3-krotność całkowitej ilości glikokalicyny obecnej na powierzchni wszystkich płytek krwi), ogólny wzrost GPIb na powierzchni płytek o 8% i pojawienie się powierzchniowej subpopulacji płytek ujemnej pod wzgl...

Przeciwciało monoklonalne przeciwko ludzkiej płytkowej glikoproteinie IIIa wykrywa pokrewne białko w hodowanych ludzkich komórkach śródbłonka.

Wcześniej opisywaliśmy serię przeciwciał monoklonalnych przeciwko glikoproteinom błony płytkowej. Dwa z przeciwciał, B59.2 i B2.12, rozpoznają kompleks glikoproteiny IIb-IIIa. Te dwa przeciwciała reagują specyficznie z glikoproteiną (GP) IIIa, co pokazano na podstawie immunoblottingu żelu z dodecylosiarczanem-poliakryloamidowym żelem solubilizowanych błon płytkowych. Monoklonalny B2.12, ale nie B59.2, wiąże się z hodowanymi ludzkimi komórkami śródbłonka uzyskanymi z żyły pępowino...

Badania kinetyczne i kinetyczne wapnia w idiopatycznej hiperkalciurii

Wagi wapniowe i badania kinetyki wapnia z użyciem 47Ca przeprowadzono u dziewięciu mężczyzn z idiopatyczną hiperkalciurią iu trzech zdrowych mężczyzn. Ostra redukcja spożycia wapnia u ośmiu pacjentów z idiopatyczną hiperkalciurią spowodowała zmniejszenie wydalania wapnia z moczem, przy czym ta ostatnia pozostała podwyższona powyżej tej zgłaszanej u zdrowych osób na diecie o niskiej zawartości wapnia. Pacjenci z hiperkalciurią mieli powiększoną mieszalną pojemność wapnia, zwięks...

Czynniki genetyczne w metabolizmie lipoprotein. Analiza genetycznego krzyżowania między wsobnymi szczepami myszy NZB / BINJ i SM / J z zastosowaniem kompletnego podejścia do mapy sprzężenia.

Krzyż genetyczny skonstruowano z dwóch rodzicielskich wsobnych szczepów myszy, NZB / BINJ i SM / J, które różnią się znacznie pod względem poziomu lipoprotein w osoczu. Wartości lipidów i apolipoprotein osocza mierzono w 184 potomstwie F2 na normalnej karmie dla dzieci i diecie miażdżycowej. Markery genetyczne były typowane w 126 loci obejmujących wszystkie chromosomy za wyjątkiem Y. Analiza statystyczna ujawniła znaczące powiązanie lub sugestywne połączenie poziomów lipoprotein z m...

Mutacja w domenie wiążącej DNA genu receptora androgenowego powoduje pełną feminizację jąder u pacjenta z oporną na receptor opornością na androgeny.

Oporność na androgeny wiąże się z szerokim zakresem ilościowych i jakościowych defektów receptora androgenowego. Jednakże hodowle fibroblastów od około 10% pacjentów z klinicznymi, endokrynnymi i genetycznymi cechami charakterystycznymi dla oporności na androgeny wyrażają normalne ilości pozornie normalnego receptora androgenowego w hodowanych fibroblastach skóry narządów płciowych (oporność receptora na androgeny). Przeanalizowaliśmy gen receptora androgenu u jednego pacjenta (P32...

Rekombinowany ludzki czynnik martwicy nowotworów-alfa. Regulacja powinowactwa i funkcji receptora N-formylometionylolucyklofenyloalaniny na ludzkich neutrofilach.

Preinkubacja neutrofili rekombinowanym ludzkim czynnikiem martwicy nowotworów-alfa (rH TNF-alfa) wzmacniała późniejsze uwalnianie anionu ponadtlenkowego w odpowiedzi na różne stężenia N-formylometionylolucylofenyloalaniny (FMLP). Zwiększone wytwarzanie anionu ponadtlenkowego było widoczne przez 5 minut i osiągnęło plateau o 15 minut. Nie tylko całkowita ilość uwolnionego anionu ponadtlenkowego była większa, ale szybkość uwalniania została również zwiększona trzykrotnie przez rH TN...

Możliwy mechanizm komórkowy do skurczu naczyń mózgowych po doświadczalnym krwotoku podpajęczynówkowym u psa.

Badanie to przeprowadzono w celu zbadania niektórych komórkowych mechanizmów jonowych odpowiedzialnych za skurcz naczyń mózgowych, który występuje w następstwie krwotoku podpajęczynówkowego (SAH). Po cysternalnej iniekcji autologicznej krwi udokumentowaliśmy skurcz tętnicy podstawnej podczas angiografii od 4 do 7 dni po zabiegu u sześciu psów. Po wyizolowaniu tych tętnic podstawnych obserwowaliśmy znaczną depolaryzację błony i zwiększoną aktywność spajków elektrycznych w porównan...

Rodzinne ginekomastia ze zwiększonym pozamiejscowym aromatyzowaniem węglowych 19 steroidów w osoczu.

Ocenialiśmy rodzinę, w której ginekomastia występowała u pięciu mężczyzn w dwóch pokoleniach. U każdego chorego ginekomastii i dojrzewania płciowego mężczyzn rozpoczął się w młodym wieku. Stosunek stężenia estradiolu-17 beta w osoczu do stężenia testosteronu w osoczu był podwyższony u każdego chorego osobnika. W przypadku trzech rodzeństwa z ginekomastią, stała transferu konwersji androstendionu do estronu (tj. Frakcja plazmy androstenedionu, która została przekształcona w e...

1,25-Dihydroksywitamina D3 zwiększa regulację szlaku sygnalizacji fosfatydyloinozytolu w ludzkich keratynocytach poprzez zwiększenie poziomów fosfolipazy C.

1,25-dihydroksywitamina D3 (1,25 (OH) 2D3) indukuje różnicowanie normalnych ludzkich keratynocytów, częściowo przez zwiększenie ich podstawowego wewnątrzkomórkowego poziomu wapnia (Cai) w ciągu kilku godzin. Agoniści, tacy jak ATP działający poprzez receptory błonowe, powodują natychmiastowy, ale przejściowy wzrost Cai, któremu towarzyszy wzrost trójsifosforanu inozytolu (IP3). Leczenie keratynocytów przez 24 hz 1 nM 1,25 (OH) 2D3 dało dwu- do czterokrotne wzmocnienie odpowiedzi Cai ty...

Molekularna heterogenność glikoproteiny limfocytów u pacjentów z niedoborem odporności.

Wcześniejsza ocena limfocytów pobranych od pacjentów z zespołem Wiskotta-Aldricha (WAS) i innymi niedoborami odporności związanymi z chromosomem X ujawniła niedobory sjaloglikoproteiny limfocytów o względnej masie cząsteczkowej 115 kD (oznaczonej jako gpL-115) występującej w prawidłowych limfocytach. Rozwój przeciwciał monoklonalnych przeciwko gpL-115 pozwolił na wykrycie heterogenności cząsteczkowej w gpL-115 z limfocytów pacjentów z niedoborem odporności. Gdy limfocyty od zdrowych ...

Czynnik stymulujący kolonię granulocytów i makrofagów. Wrażliwa i zależna od receptorów regulacja za pomocą 1,25-dihydroksywitaminy D3 w prawidłowych ludzkich limfocytach krwi obwodowej.

Pokazujemy, że 1,25-dihydroksywitamina D3 (1,25 [OH] 2D3), najbardziej hormonalnie aktywny metabolit witaminy D3, moduluje czułą i swoistą akumulację białek i matrycowego RNA wielowierszowego czynnika wzrostu stymulującego kolonie granulocytów i makrofagów czynnik (GM-CSF). Regulację ekspresji GM-CSF obserwuje się zarówno w normalnych ludzkich limfocytach T aktywowanych mitogenem, jak i limfocytach T z linii (S-LB1) transformowanej ludzkim limfotropowym wirusem limfocytów T 1 (HTLV-1). Przec...

Konkanawalina A hamuje aktywność koagulantów czynników tkankowych.

Konkanawalina A (con A) jest silnym inhibitorem koagulacyjnej aktywności natywnego czynnika tkankowego. Aktywność koagulantu odzyskuje się przez dodanie alfa-metylo-D-glukozydu w celu zahamowania czynnika tkankowego. Włączenie alfa-metylo-D-glukozy podczas inkubacji con A z czynnikiem tkankowym zachowuje aktywność koagulacyjną. Dane te sugerują, że con A oddziałuje odwracalnie z resztą węglowodanową w taki sposób, że hamuje aktywność koagulacyjną cząsteczki. Oczyszczona apoproteina c...

Indukowane przez bradykininę zmiany w obrocie fosfatydyloinozytolem w hodowanych komórkach kanalików brodawkowatych królika.

Królicze komórki brodawkowe zbierające kanaliki nerkowe wyizolowano jako homogenną populację i hodowano w hodowli pierwotnej. Komórki te utrzymywano w pełni zdefiniowanej pożywce dla zahamowania przerostu fibroblastów i dla ułatwienia znakowania endogennych fosfolipidów inozytolu za pomocą mio- [2-3H] inozytolu o wysokiej aktywności specyficznej. Komórki te wykazały morfologię, odpowiedź cyklicznego AMP i opracowanie prostaglandyny E2 (PGE2), zgodnie z poprzednimi opublikowanymi charakte...

Wpływ cytotoksycznych leków immunosupresyjnych na limfocyty wrażliwe na tuberkuliny u świnek morskich.

Aktywność immunosupresyjna dwóch leków specyficznych dla fazy, 6-merkaptopuryny (6-MP) i metotreksatu oraz czynnika specyficznego dla cyklu, cyklofosfamidu, oceniano na składniku limfocytarnym o stwierdzonej nadwrażliwości tuberkulinowej u świnek morskich. U tych zwierząt, limfocyty wrażliwe na pochodną białek (PPD) znajdują się w fazie intermitotycznej cyklu proliferacyjnego. Ani lek specyficzny dla fazy znacząco zmieniał liczbę lub czynności funkcjonalne tych limfocytów. Według dwó...

Interleukina-10 moduluje ekspresję genów kolagenu typu I i metaloproteazy macierzy w hodowanych fibroblastach ludzkiej skóry.

IL-10, pierwotnie wyizolowana z komórek T pomocniczych myszy, jest cytokiną o funkcjach regulacyjnych na wielu interleukinach. W tym badaniu pokazujemy, że rekombinowana ludzka IL-10 wpływa na ekspresję kilku genów zaangażowanych w syntezę macierzy pozakomórkowej i przebudowę w ludzkich kulturach fibroblastów skóry. Jak oceniano w analizach Northern blot, ekspresja genów kolagenu typu I była obniżona, podczas gdy ekspresja genu kolagenazy i genu stromelizyny była znacznie wzmocniona przez...

Wadliwe przetwarzanie prekursora insuliny-receptora w hodowlanych limfocytach od pacjenta z ekstremalną opornością na insulinę.

Zbadaliśmy pacjenta z ekstremalną opornością na insulinę, rogowaceniem nerek i zmniejszoną insulinowiążącą erytrocytem. Transformowane EBV limfocyty od tego pacjenta wykazywały znacząco zmniejszone wiązanie insuliny 125I. Radioaktywacja receptorów powierzchniowych komórek, a następnie immunoprecypitacja przeciwciałami antyreceptorowymi ujawniła obecność zwiększonych ilości białka 210 kD, ale nie wykryto podjednostek alfa lub beta. Ciągłe znakowanie 2- [3H] mannozą ujawniło synt...

Czynnik krzepnięcia krwi XIa wiąże się specyficznie z miejscem aktywowanych ludzkich płytek krwi, odmiennym od czynnika XI.

Wiązanie 125I-czynnika XIa do płytek krwi wymagało obecności kininogenu o wysokiej masie cząsteczkowej, zostało wzmocnione, gdy płytki były stymulowane trombiną i osiągnęło plateau po 4-6 minutach inkubacji w 37 ° C. Wiązanie czynnika XIa było swoiste: 50- do 100-krotnych nadmiarów molowych nieznakowanego czynnika XIa zapobiegało wiązaniu, podczas gdy czynnik XI, prekallikreina, czynnik XIIa i protrombina nie. Po przemyciu erytrocytów dodanych w stężeniach obliczonych w celu zapewnie...