beta-zero-talasemia na Sardynii jest spowodowana mutacją nonsensowną.

Przedstawiamy charakterystykę zmiany molekularnej beta-talasemii na Sardynii. Talassemia beta w tym obszarze jest głównie typu beta zero z niskim poziomem mRNA beta-globiny. Test translacyjny tego informacyjnego RNA w systemie bezkomórkowym wykazał syntezę łańcucha beta-globiny tylko z dodatkiem bursztynowego (UAG) supresorowego transferu RNA. Dwuniciowy komplementarny DNA przygotowany z mRNA retikulocytów od pacjenta z Sardynii został sklonowany w bakteryjnym plazmidzie i izolowany i sekwencjonowany klon zawierający komplementarny DNA beta-globiny. W pozyc...

Wykorzystanie hodowanych ludzkich komórek limfoidalnych do wykrywania uczulenia humoralnego u potencjalnych biorców przeszczepów nerek.

Potencjalni biorcy przeszczepów nerki byli testowani pod kątem limfocytotoksyczności; z nich wybraliśmy 102 surowice pozbawione przeciwciał cytotoksycznych przeciwko limfocytom obwodowym z co najmniej 80 niespokrewnionych osób. W celu wykrycia uczulenia humoralnego, poddaliśmy je reakcji z 17 hodowanymi ludzkimi limfocytowymi liniami komórkowymi mającymi różne fenotypy HL-A. Przeciwciała cytotoksyczne reagujące z tymi hodowanymi komórkami zostały teraz wykryte w niektórych surowicach. Przeciwciała te nie były skierowane przeciwko antygenom HL-A, ale ...

Nieznaczny antygen zgodności tkankowej HY ulega ekspresji na ludzkich hematopoetycznych komórkach progenitorowych.

Polimorficzne pomniejsze transplantacyjne antygeny prawdopodobnie odgrywają ważną rolę we wszczepianiu odrzucanych przeszczepów szpiku kostnym za pośrednictwem układu immunologicznego. Mapowanie tych antygenów na hematopoetycznych komórkach progenitorowych (HPC) jest ważne, ponieważ te determinanty antygenowe mogą służyć jako struktury docelowe w procesie odrzucania, a ostatecznie otwiera możliwość dopasowania do tych antygenów. Zastosowanie cytotoksyczności komórkowej z cytotoksycznymi limfocytami T zależnymi od HY jako komórek efektorowych, za...

Cukrzyca i seksualny karłowatość ateliotyczna: badanie porównawcze

Częstość występowania retinopatii cukrzycowej określono u 38 chorych na cukrzycę i 31 seksualnych atelektycznych karłów z niedoborem hormonu wzrostu (HGH). Rozkład wieku i płci był w przybliżeniu taki sam w każdej grupie. Częstość występowania i wzorzec nietolerancji glukozy były podobne u diabetyków i krasnoludów z niedoborem HGH. Większość diabetyków (21 z 38) i niedoborów HGH (26 z 31) wykazywało insulinoopenię po glukozie, mieszane posiłki z wołowiny glukozowej i napar z l-argininy. Mniejsza liczba krasnoludów z niedoborem HGH (5 z 31...

Najnowsze zdjęcia w galerii e-gastrolog:

Tłumienie wytwarzania androgenów przez hormon uwalniający hormon D-tryptofan-6-luteinizujący u człowieka.

Czterech mężczyzn transseksualnych otrzymało superwytentowy analog hormonu uwalniającego hormon luteinizujący (LHRH), D-tryptofan-6-LHRH w dziennych dawkach 100 mikrogramów przez 3 - 6 miesięcy. Zaobserwowano zmniejszenie wzrostu brody, trądziku i siły erekcji; ten ostatni został obiektywnie udokumentowany nagraniami nocnych epizodów tumescencji prącia. Poziom testosteronu i dihydrotestosteronu w osoczu spadł do wartości kastracyjnych; poziomy podstawowej prolaktyny i hormonu luteinizującego wykazywały niewielki spadek, podczas gdy hormon luteinizując...

Wnioskowanie o molekularnej wadzie apolipoproteiny B w hipobetalipoproteinemii za pomocą analizy sprzężeń w dużej rodzinie.

Heterozygotyczna hipobetalipoproteinemia charakteryzuje się zmniejszeniem stężenia cholesterolu LDL w osoczu, całkowitych triglicerydów i apo B do mniej niż 50% wartości prawidłowych. Molekularne podstawy tego zaburzenia pozostają nieznane. Fenotyp ulega kosegregacji z haplotypem DNA genu apo B w rodowodzie Idaho, z maksymalnym logarytmem dziesiętnym wskaźnika stosunku (LOD) wynoszącym 7,56 przy szybkości rekombinacji równej zero. Osoby niosące ten haplotyp miały całkowity poziom cholesterolu 96 mg / dl, poziomy cholesterolu LDL 37 mg / dl, poziomy tr...

Opróżnianie żołądka i wydzielanie w zespole Zollingera-Ellisona.

Opróżnianie żołądka i wydzielanie, a także objętość i skład soku żołądkowego określono jednocześnie u trzech pacjentów z zespołem Zollingera-Ellisona iu siedmiu zdrowych osób. Nadciśnienie w żołądku obserwowano u pacjentów z zespołem Zollingera-Ellisona iu osób zdrowych otrzymujących pentagastrynę. W przeciwieństwie do tego frakcja zawartości żołądka opróżniana na minutę (ułamkowa stopa opróżniania) była zwiększona u pacjentów Zollingera-Ellisona i niezmieniona lub zmniejszona u zdrowych osób otrzymujących pentagastrynę. Zwi...

Zwiększona ekspresja i funkcja receptorów fibronektyny VLA-4 na ludzkich aktywowanych limfocytach T w reumatoidalnym zapaleniu stawów.

Integryna VLA-4 (CD49d / CD29) jest receptorem powierzchni komórkowej zaangażowanym w interakcję komórek limfoidalnych zarówno z macierzą pozakomórkową (ECM), jak i komórkami śródbłonka. Zbadaliśmy ekspresję i funkcję receptorów fibronektyny VLA-4 (FN) na limfocytach T zlokalizowanych w zapalnej błonie maziowej u pacjentów z reumatoidalnym zapaleniem stawów (RA). Wysoki odsetek limfocytów T zarówno w błonie maziowej (SM), jak i mazi stawowej (SF) wyrażał antygeny aktywacyjne AIM (CD69) i gp95 / 85 (Ea2), a także zwiększoną liczbę cząstecze...

Niedobór kości u szczurów z wyciętymi jajnikami. Funkcjonalny wkład populacji komórek podścieliska szpiku kostnego i wpływ doustnego leczenia dihydrotachysterolem.

W tym badaniu badano proliferacyjną i osteogenną rolę komórek zrębowych szpiku kostnego / osteoprogenitorów w rozwoju deficytu kory kostnej u samic szczurów z wyciętymi jajnikami (OVX). In vitro, klonalny wzrost komórek zrębowych szpiku od szczurów OVX był znacząco upośledzony (w porównaniu z kontrolami pozorowanymi). Jednak w warunkach in vivo, komórki szczurów i szczurów OVX miały równy potencjał kościotwórczy w kilku sytuacjach eksperymentalnych in vivo, takich jak w komórkach doszczepiania dootrzewnowo wewnątrzotrzewnowo i w domięśniowyc...

Indukowane światłem uwalnianie protoporfiryny z erytrocytów w protoporfirii erytropoetycznej.

Fotofolizy normalnych erytrocytów inkubowanych z protoporfiryną zmniejsza się w obecności albuminy. Gdy globina jest dodawana do normalnych erytrocytów zawierających protoporfirynę, protoporfiryna jest związana z globiną. Podczas napromieniania protoporfiryna przemieszcza się z globiny do błony erytrocytów i inicjowana jest fotohemoliza. Erytrocyty u pacjentów z protoporfirią erytropoetyczną zawierają duże ilości protoporfiryny związanej z hemoglobiną. Po napromieniowaniu tych komórek przy braku albuminy, 40% protoporfiryny i 80% hemoglobiny zosta...

Degradacja kolagenu przez ludzki układ kolagenolityczny granulocytów

Ten raport sugeruje mechanizm degradacji kolagenu, w którym pośredniczą ludzkie granulocytowe leukocyty. Specyficzna kolagenaza, którą można ekstrahować z ludzkich granulocytów, została częściowo oczyszczona za pomocą chromatografii DEAE. Ten enzym kolagenolityczny działa w fizjologicznym pH i jest hamowany przez EDTA, cysteinę i zredukowany glutation, ale nie przez ludzką surowicę. Enzym rozszczepia cząsteczkę kolagenu na dwa specyficzne produkty, bez utraty konformacji helikalnej. Mikrografy elektronowe agregatów o długich odstępach między segm...

Aktywacja transbłonowa za pośrednictwem czynnika płytkowego w ludzkich limfocytach B jest regulowana przez szlak wrażliwy na toksynę krztuśca i cholery.

Czynnik aktywujący płytki krwi (PAF) stymuluje ludzkie limfocyty B, powodując zwiększenie wewnątrzkomórkowego wapnia i uwalnianie fosforanów inozytolu. Ta droga przekazywania sygnału jest zahamowana w obecności krztuśca (PT) lub toksyny cholery (CT). Preinkubacja ludzkich komórek B za pomocą albo toksyny, ale nie ich nieaktywnych podjednostek, przez 3 h blokowała te indukowane PAF odpowiedzi w dwóch limfoblastoidalnych liniach komórkowych. Efekt ten był zależny od czasu, z pewną inhibicją odnotowaną po 30 minutach, ale dopiero po inkubacji wstępne...

Interferon-gamma przezwycięża glukokortykoidową supresję biosyntezy kachektyna / czynnik martwicy nowotworu przez mysie makrofagi.

Glukokortykoidy prawie całkowicie hamują syntezę przez wyizolowane makrofagi czynnika martwicy nowotworu / TNF (ang. Cachectin / tumor necrosis factor), cytokiny będącej głównym endogennym mediatorem wstrząsu septycznego. Pomimo tej skuteczności in vitro kliniczne zastosowanie glukokortykoidów nie przyniosło żadnych wyraźnych korzyści w leczeniu wstrząsu septycznego. Aby zrozumieć, jakie inne mechanizmy mogą odgrywać rolę u pacjenta z posocznicą, zbadaliśmy wpływ interferonu gamma (IFN gamma) na syntezę cachectin / TNF. Pokazujemy tutaj, że IFN...

Faza I: Badanie czynnika stymulującego wzrost kolonii granulocytów u pacjentów z przejściowym rakiem komórkowym nabłonka dróg moczowych.

Rekombinowany ludzki czynnik stymulujący kolonie granulocytów (rhG-CSF) podawano w dawce 1-60 mikrogramów / kg masy ciała 22 pacjentom z przejściowym rakiem komórek przed chemioterapią w ramach badania fazy I / II. U wszystkich pacjentów obserwowano zależne od dawki zwiększenie bezwzględnej liczby neutrofilów (ANC) o 1,8 - 12-krotnie. Dodatkowo, temu zwiększeniu w ANC towarzyszył wzrost alkalicznej fosfatazy leukocytów, markera tworzenia się wtórnych granulek. U sześciu z ośmiu analizowanych pacjentów zaobserwowano wzrost stosunku szpikowego szpiku...

Bezpośrednie zapisy temperatury w drzewie tracheoskronowym u normalnego człowieka.

W celu ustalenia, jak głęboko wdychane powietrze może przedostać się do dróg oddechowych przed doprowadzeniem do warunków ciała, zmierzyliśmy temperaturę w drogach oddechowych przedniego odcinka podstawnego prawego dolnego płata u pięciu normalnych osobników, podczas gdy oni oddychali powietrzem w temperaturze poniżej zera i warunki otoczenia. Podczas spokojnego oddychania większość ogrzewania dostarczanego gazu odbywała się w górnych drogach oddechowych zgodnie z oczekiwaniami. Jednak wraz ze wzrostem obciążenia termicznego szybkimi wdechami, zi...

Hemoglobina Yoshizuka (G10 (108) a asparagina a) kwas asparaginowy): nowy wariant o obniżonym powinowactwie tlenowym pochodzący z japońskiej rodziny

W trakcie badania w japońskiej rodzinie napotkano nową hemoglobinę, oznaczoną hemoglobiną Yoshizuka. Klinicznie, łagodna anemia występowała u pięciu z sześciu heterozygotycznych osobników, ale nie stwierdzono żadnych innych istotnych nieprawidłowości. Hemoglobina Yoshizuka charakteryzuje się podstawieniem kwasu asparaginowego dla asparaginy w dziesiątej reszcie helisy G w łańcuchu a. Zmniejszone powinowactwo tlenu z prawie normalną interakcją hemu-hemu okazało się być właściwością tej nieprawidłowej hemoglobiny. Reszta asparaginowa G10 (108...

Niewrażliwość na komórki B w szczurzym modelu cukrzycy insulinoniezależnej. Dowód na szybko odwracalny wpływ wcześniejszej hiperglikemii.

W perfundowanej trzustce u szczurów, u których stwierdzono cukrzycę po zastrzyku streptozotocyny (STZ) w wieku noworodkowym, odpowiedź insulinowa na 27 mM glukozy była znaczna, ale upośledzona. Na jego działanie nie wpływał alfa adrenergiczny bloker fentolaminy. Gdy dodano 27 mM mannoheptulozy jednocześnie z 27 mM glukozy, uwalnianie insuliny było zahamowane, ale mniej szybko niż w trzustkach szczurów bez cukrzycy. Po wprowadzeniu mannoheptulozy 15 minut po rozpoczęciu perfuzji z 27 mM glukozy, hamowanie było widoczne u szczurów bez cukrzycy, ale nie w...

Czynnik stymulujący kolonię granulocytów i makrofagów. Wrażliwa i zależna od receptorów regulacja za pomocą 1,25-dihydroksywitaminy D3 w prawidłowych ludzkich limfocytach krwi obwodowej.

Pokazujemy, że 1,25-dihydroksywitamina D3 (1,25 [OH] 2D3), najbardziej hormonalnie aktywny metabolit witaminy D3, moduluje czułą i swoistą akumulację białek i matrycowego RNA wielowierszowego czynnika wzrostu stymulującego kolonie granulocytów i makrofagów czynnik (GM-CSF). Regulację ekspresji GM-CSF obserwuje się zarówno w normalnych ludzkich limfocytach T aktywowanych mitogenem, jak i limfocytach T z linii (S-LB1) transformowanej ludzkim limfotropowym wirusem limfocytów T 1 (HTLV-1). Przeciwnie, komórki z linii limfocytów T transformowanych HTLV-1 ust...

Kultura in vitro komórek eksfoliowanych w moczu przez pacjentów z cukrzycą.

Jako podejście ułatwiające zrozumienie postępu cukrzycowej choroby nerek, ocenialiśmy mocz chorych na cukrzycę i normalnych ochotników na obecność komórek, które można hodować in vitro. Wyniki sugerują, że zarówno normalna grupa kontrolna jak i pacjenci z cukrzycą, bez klinicznie wykrywalnej mikroangiopatii, złuszczają kilka komórek w moczu. W przeciwieństwie do tego, chorzy na cukrzycę z udokumentowaną retinopatią, ale bez nefropatii złuszczają znacznie większą liczbę komórek zdolnych do hodowli (5,2 komórek / 100 ml moczu), podczas gdy...

Ludzki czynnik stymulujący kolonie granulocytowo-makrofagowe indukuje ekspresję genu czynnika martwicy nowotworu przez linię komórkową U937 i normalne ludzkie monocyty.

Czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów i makrofagów (GM-CSF) wywiera głęboki wpływ na proliferację, różnicowanie i funkcję efektorową komórek linii mieloidalnej. W przeciwieństwie do jego wpływu stymulującego wzrost na normalne szpikowate komórki progenitorowe, stwierdziliśmy, że GM-CSF nieoczekiwanie hamuje wzrost kolonii komórek U937 w hodowli agarowej. Ponadto stwierdzono, że pożywka uwarunkowana przez rekombinowane komórki U937 traktowane GM-CSF (rGM-CSF) wywiera hamujący wpływ na dalszy wzrost kolonii U937, co częściowo wynikał...

Niskocząsteczkowe żelazo i paradoks tlenu w izolowanych sercach szczurów.

Niewiele wiadomo na temat zmian w ilości żelaza w wewnątrzkomórkowej puli o niskiej masie cząsteczkowej, która katalizuje reakcje Fenton podczas reperfuzji po niedokrwieniu. W tym badaniu przedstawiono nowe podejście do pomiaru żelaza o niskiej masie cząsteczkowej i jest ono stosowane do normalnych serc podczas niedokrwienia i serc obciążonych żelazem podczas niedotlenienia i reoksygenacji. Wyniki tego badania pokazują, że (a) podczas niedokrwienia w prawidłowych sercach 30-krotny wzrost występuje w żelazie o małej masie cząsteczkowej po 45 minutach...

Krążące kompleksy immunologiczne i czynnik reumatoidalny immunoglobuliny A u pacjentów z mezangialną immunoglobuliną A nefropatii.

Krążące kompleksy immunologiczne (CIC) zawierające IgA i C3 były podwyższone u 48% pacjentów z nefropatią IgA; IgA1 była dominującą podklasą. IgE1-IgG CIC wykryto w 44%, IgA2-IgG CIC w 7%, a IgM-IgA1 CIC u 16% pacjentów. Nie wykryto CIC IgM-IgA2. Ultrawirowanie z gradientem sacharozy wykazało, że IgG-IgA1 CIC miały przeważnie średnicę pośrednią (13-19S), podczas gdy IgA1-C3 CIC osiadały od 11S do 19S. Przy kwaśnym pH wyizolowany CIC ujawnił obecność znacznych ilości 7S IgA. Jedna trzecia pacjentów miała podwyższony poziom czynnika reumato...

Leukotriene B4 stymuluje adhezję leukocytów polimorfojądrowych do hodowanych komórek śródbłonka naczyniowego.

Adhezja leukocytów polimorfojądrowych (PMN) do śródbłonkowej wyściółki naczyń krwionośnych jest zasadniczym elementem odpowiedzi zapalnej. Zbadaliśmy wpływ różnych metabolitów lipooksygenazy kwasu arachidonowego na adhezję PMN do hodowanych komórek śródbłonka naczyniowego, stosując ilościowy test adhezji jednowarstwowej. Nasze wyniki wskazują, że leukotrien B4 (LTB4) może skutecznie stymulować adhezję PMN do powierzchni komórek śródbłonka, w przeciwieństwie do leukotrienów sulfidopeptydowych C4, D4 i E4, oraz produkty z lipooksygenazy ...

Wpływ zmienności całkowitego spożycia energii i składu diety na regulację lipolizy komórek tłuszczowych u osób o idealnej wadze.

Utrzymujące wagę, bogate w tłuszcz, "ostrożne", bogate w węglowodany, a także dietę o obniżonej energii (300 kcal / d) były karmione kolejno przez 7 d do 12 zdrowych mężczyzn o idealnej masie ciała w warunkach oddziału metabolicznego. Pod koniec każdego okresu izolowane komórki tłuszczowe przygotowywano z podskórnej tkanki tłuszczowej brzusznej i inkubowano in vitro w nieobecności lub obecności deaminazy adenozyny, samodzielnie lub w połączeniu z różnymi hormonami i środkami lipolitycznymi lub antylipolitycznymi. Różnice w całkowi...

Związana z błoną reduktaza cytochromu b5 (reduktaza methemoglobiny) w ludzkich erytrocytach. Badanie na przedmiotach normalnych i methemoglobinemicznych.

W niniejszym badaniu przedstawiamy dowody na to, że reduktaza reduktazy reduktazy NADH-cytochromu b5 (reduktaza methemoglobiny) jest nie tylko rozpuszczalna, ale również ściśle związana z błoną. Aktywność podobną do reduktazy methemoglobiny jest zdemaskowana przez traktowanie Tritonem X-100 i stanowi około połowy całkowitej aktywności w erytrocytach. Podobnie jak amfifilowy związany z mikrosomem reduktazy cytochromu b5, enzym związany z błoną erytrocytów jest rozpuszczany przez katepsynę D. Ponieważ ta terapia jest skuteczna w przypadku nieuszcze...

Stabilne rodniki nitroksydowe chronią kardiomiocyty przed uszkodzeniami oksydacyjnymi.

Ochronne działanie stabilnych rodników nitroksydowych na uszkodzenia oksydacyjne badano za pomocą hodowli kardiomiocytów otrzymanych od nowonarodzonych szczurów. Jednowarstwowe kardiomiocyty poddano ekspozycji na H2O2 i określono wpływ na spontaniczne pobudzenie i wyciek LDH. Nadtlenek wodoru nieodwracalnie blokował rytmiczne bicie i powodował znaczące uszkodzenie błony, jak wykazano przez uwalnianie LDH. Urazowi zapobiegała katalaza, która usuwa H2O2 i przepuszczalne dla komórek czynniki chelatujące metal, takie jak desferrioksamina lub bipirydyna. Nat...

Specyficzne wiązanie antygenu z ludzkimi limfocytami T.

Wykazano, że ludzkie limfocyty T uczulone na Candida albicans (CA) proliferują w hodowlach indukowanych mannanem, rozgałęzionym polisacharydem ekstrahowanym ze studzienki komórkowej CA. Obecnie opisujemy, że gdy używano silnie znakowanego [3H] mannanu, specyficzne dla antygenu komórki T były zdolne do wiązania znakowanego mannanu na ich błonie. Obserwacje, że nieistotne komórki blastyczne nie wiązały [3H] mannanu i że specyficzne dla mannanu komórki blastyczne nie wiązały się z trytowanym pneumokokowym polisacharydem SIII, wskazują na specyficzno...

Regulacja C / EBP beta genu alfa czynnika martwicy nowotworów.

Aktywowane makrofagi przyczyniają się do przewlekłego stanu zapalnego poprzez wydzielanie cytokin i proteinaz. Czynnik martwicy nowotworu alfa (TNF alfa) jest szczególnie ważny w tym procesie ze względu na jego zdolność do regulowania innych mediatorów stanu zapalnego w autokrynny i parakrynny sposób. Mechanizm (y) odpowiedzialny za regulację TNF alfa specyficznej dla typu komórek nie jest znany. Prezentujemy dane wykazujące, że ekspresja TNF alfa jest regulowana przez czynnik transkrypcyjny C / EBP beta (NF-IL6). C / EBP beta aktywowało promotor genu T...

Aktywowana przez naskórkowy hydrolizę fosfoinozytydów w hodowanych szczurzych wewnętrznych komórkach rdzeniowych zbierających kanaliki. Regulacja przez białko G, wapń i kinazę białkową C.

Epidermalny czynnik wzrostu (EGF) wykazuje specyficzne nasycalne wiązanie z hodowanymi wewnętrznymi rdzeniowymi komórkami kanalików hodowlanych szczura i stymuluje wytwarzanie trisfosfonianu inozytolu (IP3) przez te komórki w sposób zależny od dawki. Stymulacja EGF stymulowana przez IP3 jest wzmacniana przez GTP gamma s lub AIF4- i jest hamowana przez GDP beta lub toksynę krztuścową. Zmiany w zewnątrzkomórkowym Ca2 + nie mają wpływu na produkcję IP3 stymulowaną przez podstawną lub stymulowaną EGF. Podobnie, leczenie EGTA, które zmniejsza stężenie ...

Autoimmunologiczne limfocyty T w myasthenia gravis. Określanie docelowych epitopów przy użyciu linii T i rekombinowanych produktów mysiego nikotynowego genu receptora acetylocholinowego.

Oligoklonalne i sklonowane linie T z krwi obwodowej lub grasicy chorych z myasthenia gravis (MG) wybrano do reaktywności wobec nikotynowych receptorów acetylocholinowych (AChR) z Torpedo california lub przeciwko rekombinowanemu peptydowi fuzyjnemu, X4, reprezentując zewnątrzkomórkową część mysiego AChR. łańcuch alfa. Wszystkie linie komórkowe wyrażały fenotyp błony komórkowej CD4, a ich reaktywność antygenowa była blokowana przez przeciwciała przeciwko monomorficznym determinantom HLA DR / DP. Używając panelu białek fuzyjnych z różnych, nakła...

Rola centralnych adrenoceptorów alfa-1 w narkolepsji psów.

Rola centralnych receptorów adrenergicznych alfa-1 w katapleksji została zbadana u genetycznie narkoleptycznych pinczerów Dobermana. Leczenie narkoleptycznych psów za pomocą 25-600 mikrogramów / kg prazosyny, selektywnego blokera receptora alfa-1 adrenergicznego, zaostrzało katapleksję, podczas gdy leczenie agonistą alfa-1, metoksaminą, łagodziło go. Kolejne badania wykazały, że korzystny wpływ klasycznego leczenia narkolepsji u ludzi (amfetaminy i trójcykliczne leki przeciwdepresyjne) jest antagonizowany przez prazosin, co sugeruje, że leki te są ak...

Apolipoproteina C-III-1 aktywuje sfingomielinazę lizosomalną in vitro.

Apolipoproteina (apo) C-III-1 z ludzkiej lipoproteiny o bardzo niskiej gęstości stymuluje 14-krotnie aktywność lizosomalnej sfingomielinazy z ludzkich fibroblastów. Przy badanych stężeniach sfingomieliny maksymalną stymulację uzyskano przy użyciu 5 mikroM apoC-III-1 lub mieszaniny apoC. Apolipoproteiny AI, A-II, B i CI powodowały niewielką stymulację lub brak stymulacji. Sfingomielinazy stymulowano 20-krotnie przez lizofosfatydylocholinę o optymalnym stężeniu 70 mikroM przy użyciu 0,3 mM substratu. Aktywność sfingomielinazy była hamowana przez stę...

Adenowirusowa ekspresja bramkowanego napięciem kanału potasowego in vitro (szczurzych miocytów sercowych) i in vivo (wątroba szczura). Nowa strategia modyfikacji pobudliwości.

Pobudliwość zależy przede wszystkim od dopełnienia kanałów jonowych w błonie komórkowej, które kształtują kontur potencjału czynnościowego. Aby zmodyfikować pobudliwość poprzez transfer genów, stworzyliśmy rekombinowany adenowirus zaprojektowany do nadekspresji kanału potasowego Drosophila Shaker (AdShK). In vitro, wiele rodzajów komórek ssaków zakażonych AdShK wykazało silną ekspresję egzogennego kanału. Spontaniczne potencjały czynnościowe zarejestrowane z miocytów sercowych w hodowli pierwotnej zostały skrócone w porównaniu z nieinf...

Izolacja komplementarnego klonu DNA ludzkiego C2 dopełniacza i jego zastosowanie w identyfikacji polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych.

Komplementarne klony DNA (cDNA) odpowiadające głównemu antygenowi zgodności tkankowej (MHC) klasy III, białko dopełniacza C2, zostały wyizolowane z bibliotek ludzkich cDNA wątroby przy użyciu złożonej mieszaniny syntetycznych oligonukleotydów (17 merów), która zawiera 576 różnych sekwencji oligonukleotydowych . CDNA C2 użyto do zidentyfikowania polimorfizmu długości fragmentu enzymu restrykcyjnego DNA, który zapewnia marker genetyczny w MHC, który nie był wykrywalny na poziomie białka. Dogłębne poszukiwanie polimorfizmów genomowych przy użyc...

Charakterystyka wirusa powodującego przejściowy kryzys aplastyczny.

Przejściowy kryzys aplastyczny u dzieci z wrodzonymi anemiami hemolitycznymi powiązano epidemiologicznie z zakażeniem wirusem podobnym do parwowirusa (SPLV). Wirus znajduje się we krwi we wczesnych stadiach kryzysu, a surowica zawierająca SPLV hamuje tworzenie kolonii erytrocytów in vitro. Po sedymentacji surowic zawierających wirusa przez gradient gęstości sacharozy, aktywność hamowania kolonii występuje w frakcji cząstek stałych i oddziela się od immunoglobulin w surowicy. Żadna aktywność hamująca nie może być odzyskana z surowic w fazie rekonwa...

Publiczna determinanta antygenowa w rodzinie cząsteczek HLA-B.

Serologiczna reaktywność krzyżowa między allelowymi produktami genowymi zwykle występuje w kompleksie HLA, ale podstawa molekularna tych zjawisk serologicznych jest niecałkowicie scharakteryzowana. Ze względu na silną reaktywność krzyżową między antygenami zawierającymi grupę reaktywną krzyżowo B7 (tj. HLA-B7, Bw22, B27, B40 i Bw42) oraz z powodu połączenia kilku antygenów z tej grupy z spondyloartropatią, rozpoczęliśmy badanie chemiczna podstawa reaktywności krzyżowej wśród tej grupy antygenów. Korzystając z klasycznych procedur serologic...

Biosyntetyczne i strukturalne badania białek o ciężkim łańcuchu

Nowe białko o ciężkim łańcuchu (? HCD-JM) zostało scharakteryzowane za pomocą kryteriów antygenowych i strukturalnych. Białko należy do podklasy IgG3 i jest blisko spokrewnione z fragmentem Fc immunoglobulin G3. Dominującym N-końcowym aminokwasem tego białka jest kwas glutaminowy w postaci niecyklizowanej, a inny? HCD jest glicyną. Badania N-końcowych peptydów wskazują, że N-końcowa część łańcucha ciężkiego polipeptydu A3 jest nieobecna w JHCD-JM. Wyniki te wykluczają proces normalnej inicjacji ciężkiego łańcucha i dużą delecję region...

Antysensowne oligonukleotydy interleukiny-6 hamują wzrost ludzkich linii komórek szpiczaka.

Wykazano, że IL-6 jest czynnikiem wzrostu plazmocytomy u myszy i uważa się, że odgrywa ona kluczową rolę w rozwoju ludzkiego szpiczaka mnogiego. Zbadaliśmy wymagania IL-6 dla wzrostu dwóch ludzkich linii komórek szpiczaka, U266 i RPMI 8226. Te linie komórkowe wydzielały niewielkie ilości IL-6 (20 U / ml) i zawierały mRNA IL-6. Receptory IL-6 były wykrywalne na powierzchni komórek złośliwych za pomocą immunofluorescencji. Przeciwciała przeciwko IL-6 nie zmieniały proliferacji tych komórek szpiczaka. Zmniejszenie zależne od dawki nastąpiło jednak...

Mutacja mutacji w kodonie 188 ludzkiego genu lipazy lipoproteinowej jest częstą przyczyną niedoboru lipazy lipoproteinowej u osób o różnych przodkach.

Lipaza lipoproteinowa (LPL) odgrywa kluczową rolę w regulacji metabolizmu lipoprotein poprzez hydrolizę rdzeniowych triglicerydów krążącej chylomikronów i VLDL. Komplementarne klony DNA dla ludzkiej, bydlęcej, mysiej i świnki morskiej zostały niedawno wyizolowane i wiadomo, że organizacja ludzkiego genu LPL zawiera 10 eksonów obejmujących około 30 kb. Podajemy podobną mutację na 21 allelach z 13 niepowiązanych probandów z niedoborem LPL pochodzenia francuskiego, kanadyjskiego, angielskiego, polskiego, niemieckiego, holenderskiego i wschodnioindyjski...

Sprzężenie bodźce-wydzielanie indukowanego glukozą uwalniania insuliny. Metaboliczne i funkcjonalne działanie NH4 + w wysepkach szczurzych.

NH4 + powodował zależne od dawki, szybkie i odwracalne hamowanie uwalniania insuliny stymulowanej glukozą przez wyizolowane wysepki szczurzego. Hamował on także wydzielanie insulunu stymulowane gliceralemem, Ba2 + i sulfonylomocznikiem. NH4 + nie wpływał na wykorzystanie glukozy i utlenianie, stymulowaną glukozą biosyntezę proinsuliny, stężenie ATP, AD i AMP oraz wewnątrzkomórkowe pH. NH4 + również nie wpływał na zdolność teofiliny i cytochalazyny B do wzmacniania indukowanego glukozą uwalniania insuliny. Jednakże w obecności i nieobecności glu...

Nieprawidłowość lipoproteinowa w chorobie Tangier: ilościowe oznaczanie apoprotein.

W tym badaniu ustaliliśmy na podstawie testu radioimmunologicznego i podwójnej immunoelektroforezy całkowite ilości i rozkłady apoprotein A u trzech dorosłych pacjentów dotkniętych chorobą Tangier (dziedziczny niedobór alfa-lipoprotein). W porównaniu z prawidłowym osoczem, całkowite ilości apoprotein AI i A-II w osoczu Tangeru określono jako mniejsze niż 1% i 5-7%, odpowiednio. U pacjentów z Tangeru około 90% AI apoproteiny osiadło, gdy ultrawirowanie osocza przeprowadzono przy gęstości 1,21 g / ml KBr. Przeciwnie, ponad 95% apoproteiny A-II unosi...

Badania kinetyczne i kinetyczne wapnia w idiopatycznej hiperkalciurii

Wagi wapniowe i badania kinetyki wapnia z użyciem 47Ca przeprowadzono u dziewięciu mężczyzn z idiopatyczną hiperkalciurią iu trzech zdrowych mężczyzn. Ostra redukcja spożycia wapnia u ośmiu pacjentów z idiopatyczną hiperkalciurią spowodowała zmniejszenie wydalania wapnia z moczem, przy czym ta ostatnia pozostała podwyższona powyżej tej zgłaszanej u zdrowych osób na diecie o niskiej zawartości wapnia. Pacjenci z hiperkalciurią mieli powiększoną mieszalną pojemność wapnia, zwiększoną szybkość obrotu wapnia, zwiększone tworzenie kości i sz...

Ludzka linia komórkowa chłoniaka z wieloma rearanżacjami immunoglobulin.

Opracowanie systemu hodowli komórkowej skutecznego w tworzeniu linii komórkowych chłoniaka umożliwiło analizę podstawowych biologicznych i molekularnych aspektów komórek chłoniaka. Ustaliliśmy linię komórkową chłoniaka od pacjenta z chłoniakiem z limfocytów B. Linia komórkowa ma złożony kariotyp z translokacjami obejmującymi prążki 8q24, 14q32 i 18q21. Analiza molekularna wykazała, że gen Myc został zmieniony; nie byliśmy w stanie wykazać rearanżacji genu Bcl-2. Ocena struktury genu ciężkiego łańcucha Ig wykazała, że linia komórkowa ...

Bezpieczeństwo i immunogenność szczepionki koniugatowej O-polisacharyd A Pseudomonas aeruginosa u ludzi.

Wolny od lipidy A polisacharyd (PS) wyizolowany z lipopolisacharydu Pseudomonas aeruginosa immunotyp 5 (LPS) był kowalencyjnie sprzężony z toksyną A przez redukcyjne aminowanie. Koniugat PS-toksyny A składał się z 29,8% PS i 70,2% toksyny A, o masie cząsteczkowej większej niż 1 X 10 (6), był nietoksyczny dla zwierząt i nie był pirogenny dla królików w dawce 50 mikrogramów / kg ciała wt. po podaniu dożylnym. Koniugat wywoływał jedynie łagodne, przejściowe reakcje po podaniu podskórnym ochotnikom. Szczepionka wywoływała przeciwciało G (IgG) imm...

Grasica w miastenii gravis. Izolacja linii limfocytów T specyficznych dla nikotynowego receptora acetylocholiny z grasicy u pacjentów z miastenią.

Uważa się, że grasica odgrywa kluczową rolę w patogenezie miastenii rzekomej (MG). Zgodnie z poprzednią hipotezą, MG jest inicjowana w obrębie grasicy przez immunogenną prezentację lokalnie wytwarzanego nikotynowego receptora acetylocholinowego (AChR) potencjalnie autoimmunologicznym komórkom T. Dane 10 kolejnych pacjentów MG wykazują dwie krytyczne cechy grasicy MG, które wspierają koncepcję intratymicznej aktywacji autoreaktywnych limfocytów specyficznych dla AChR. Morfologicznie grasica wykazała hiperplazję limfocytarną w dziewięciu przypadkach...

Oporność melanowskich eliptocytów (owalocytów) na inwazję pasożytów Plasmodium knowlesi i Plasmodium falciparum in vitro.

Erytrocyty od ludzi z eliptptocytami melanezyjnymi są oporne na inwazję przez Plasmodium falciparum in vitro, a dane epidemiologiczne sugerują, że mogą być oporne na P. vivax i P. malariae. Zbadaliśmy zdolność merozoitów P. knowlesi do inwazji melanowskich eliptocytów in vitro jako definitywnego sposobu badania tych komórek pod kątem odporności na inwazję przez gatunki malaryczne o różnych wymaganiach receptorowych. Melanezyjne eliptocyty były wysoce oporne na inwazję merozoitów P. knowlesi, co wskazuje, że oporność związana z tym wariantem ery...

Immunoglobulina G jest białkiem wydzielającym granulki alfa w postaci płytek krwi.

Wiadomo od 27 lat, że płytki krwi zawierają IgG, ale jego subkomórkowe umiejscowienie i znaczenie nigdy nie zostały jednoznacznie określone. W tych badaniach ustalono lokalizację IgG w ludzkich płytkach krwi za pomocą technik immunocytochemicznych oraz odpowiedzi IgG płytek na czynniki, które powodują wydzielanie płytek krwi. Stosując zamrożone cienkie skrawki płytek i immunogolkową sondę IgG umiejscowiono wewnątrz granulek alfa. Stymulacja trombiną powodowała równoległe wydzielanie IgG płytek krwi i dwóch znanych białek alfa-granulek, czynni...

Interleukina 2 pośredniczy w stymulacji biosyntezy dopełniacza C3 w ludzkich proksymalnych kanalikach nabłonkowych.

Poprzednie raporty sugerowały wytwarzanie składników dopełniacza C4, C2 i czynnika B przez tkankę nerkową. Komórki biorące udział w produkcji dopełniacza nie zostały jednak zidentyfikowane. W tym badaniu eksperymenty z etykietowaniem metabolicznym wykazały, że ludzkie komórki nabłonka kanalików proksymalnych (PTEC) syntetyzują prekursor o masie cząsteczkowej 180 kD, który jest wydzielany po cięciu proteolitycznym w dwułańcuchową cząsteczkę połączoną dwusiarczkiem, występującą w osoczu. C3 występujące w supernatantach hodowli PTEC było...

Peptyd 1 podobny do glukagonu wspomaga uczucie sytości i hamuje przyjmowanie energii u ludzi.

Zbadaliśmy wpływ podawanego dożylnie glukagonopodobnego peptydu 1 (GLP-1) na odczucia subiektywnego apetytu po śniadaniu utrwalonym energetycznie i na spontanicznej dostawie energii na lunch ad libitum. 20 młodych, zdrowych, zdrowych mężczyzn uczestniczyło w kontrolowanym placebo, randomizowanym, zaślepionym, krzyżowym badaniu. Infuzję (GLP-1, 50 pmol / kg.h lub roztwór soli) rozpoczęto równocześnie z rozpoczęciem posiłków testowych. W celu oceny wrażliwości na apetyt podczas eksperymentu i smakowitości posiłków testowych stosowano wizualne wagi...

Nieprawidłowy łańcuch alfa 2 w kolagenie typu I od pacjenta z postacią osteogenezy imperfecta.

Fibroblasty skóry w hodowli od kobiety o łagodnej do umiarkowanej postaci niedoskonałości osteogenezy syntetyzują dwa rodzaje prokolagenu typu alfa 2 typu I. Jeden łańcuch jest normalny. Nieprawidłowy łańcuch ma nieco szybszą ruchliwość niż normalna podczas elektroforezy w żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu. Analiza peptydów z bromocyjanem łańcucha pro-alfa, łańcucha alfa i ssaczy produktów rozszczepiania kolagenazy w łańcuchach pro-alfa i alfa wskazuje, że nieprawidłowość jest ograniczona do fragmentu CB4 alfa (I) i jest zgodn...

Hemoglobiny McKees Rocks (alpha2beta2145Tyr prowadzi do Term). Ludzka "nonsensowna" mutacja prowadząca do skróconego łańcucha beta.

Pierwszym przykładem przedwczesnego zakończenia łańcucha polipeptydowego u człowieka wydają się być Hb McKees Rocks, a beta145 Tyr prowadzi do Term, odkrytego u policystycznych członków rasy kaukaskiej. Mutacja punktowa najwyraźniej wystąpiła w kodonie dla Tyr beta145 z UAU do kodonu "nonsensownego", UAA lub UAG, skutkując skróconym łańcuchem polipeptydowym z Lys 144 jako jego aminokwasem na końcu karboksylowym. Dowodem tego strukturalnego wniosku jest brak peptydu tryptycznego betaT-15 z "odcisków palców" nieprawidłowego łań...

Fizjologiczne pomiary mieszania światła u psa i ludzkiego jelita cienkiego.

Odporność na absorpcję spowodowaną słabym mieszaniem zawartości światła (RLum) uważa się za równoważną nieprzeszkolonej warstwie o wartości większej niż 600 mikronów w ludzkim jelicie cienkim. Mierzono RLum w jelicie czczym świadomych psów, oceniając szybkość wchłaniania dwóch szybko przyswajalnych sond, glukozy i [14C] warfaryny. Gdy RLum wyrażano jako niezwulkanizowaną warstwę, maksymalna grubość warstwy niestopionej (zakładając znikomą oporność komórek nabłonka) wynosiła tylko około 35 i 50 mikronów dla szybkości perfuzji odp...

Średnia toniczność reguluje ekspresję zależnego od Na (+) i Cl (-) - transporter betainy w komórkach nerki Madin-Darby poprzez zwiększenie transkrypcji genu transportera.

Betaina jest jednym z głównych kompatybilnych osmolitów nagromadzonych przez nerkowe komórki nerkowe Madin-Darby hodowane w hipertonicznej pożywce. Betaina akumulowana jest przez wychwyt zależny od Na (+) - i Cl (-) od pożywki. Aby uzyskać wgląd w mechanizm, w którym hipertoniczność wywołuje wzrost Vmax transportera betainy w komórkach nerki psa Madin-Darby, zmierzono względną obfitość mRNA dla transportera w komórkach przeniesionych do hipertonicznego ośrodka i stwierdzono równoległy wzrost mRNA aktywność obfitości i kotersportu. Wzrost pozio...

Związki witaminy D. Wpływ na klonalną proliferację i różnicowanie ludzkich komórek szpikowych.

Zbadaliśmy wpływ 1 alfa, 25-dihydroksywitaminy D3 (1 alfa, 25 (OH) 2D3) i różnych analogów witaminy D na proliferację i różnicowanie normalnych i białaczkowych komórek kolonijnych mieloidalnych. Tylko komórki z linii białaczkowych szpiku, które zawierały względnie dojrzałe komórki (HL-60, U937, THP, HEL, M1) zostały zaindukowane w celu różnicowania i były hamowane w ich klonalnym rozwoju poprzez ekspozycję na 1 alfa, 25 (OH) 2D3 (50% hamowania 3 X 10 (-8) -8 X 10 (-10) M). Fluorowany analog witaminy D był 5-10-krotnie silniejszy niż 1 alfa, 25 ...

Terapeutyczne stężenia glukokortykoidów hamują aktywność przeciwbakteryjną człowieka

Poprzez eksponowanie ludzkich makrofagów krwiopochodnych i makrofagów pęcherzykowych in vitro na deksametazon, wykazaliśmy w tych badaniach, że glukokortykoidy znacząco hamują aktywność przeciwdrobnoustrojową makrofagów, ale nie aktywują makrofagów przez limfokiny. Już tylko 2,5 X 10 (-8) mol / litr deksametazonu zapobiegło makrofagom zahamowania kiełkowania zarodników Aspergillus lub eliminacji połkniętych bakterii, takich jak Listeria, Nocardia lub Salmonella. Uszkodzenie funkcji makrofagów było hamowane przez progesteron i wydawało się, że j...

Trijodotyronina wzmaga odpowiedź nerek na aldosteron w kanalikach zbierających królika.

Ponieważ zaobserwowano, że hormony tarczycy i mineralokortykoidy stymulują nerkową Na-K-ATPazę w podobnych miejscach iz podobnymi przebiegami czasowymi, to badanie rozpoczęto w celu oceny, czy aldosteron jest zaangażowany w stymulację Na-K-ATPazy obserwowaną w zbieraniu kanalików 3 godziny po podanie trójjodotyroniny (T3) królikom poddanym tarczycy (TX). Wyniki wskazują, że: Poziom aldosteronu w osoczu znacznie się zmniejszył u królików TX, ale nie został przywrócony 3 godziny po wstrzyknięciu T3; Wczesna stymulacja Na-K-ATPazy przez T3 została z...

Relaks anafilaktyczny bazofilowej aktywności podobnej do kalikreiny. II. Pośrednik natychmiastowych reakcji nadwrażliwości.

W tym raporcie opisano uwalnianie immunologiczne nowego mediatora z ludzkich leukocytów obwodowych, aktywność podobną do kalafoniny bazowej (BK-A). Proces uwalniania inicjowany jest przez oddziaływanie antygenu na anty-IgE z komórkową IgE i wydaje się być podobny w mechanizmie do relazy histaminy i innych mediatorów bezpośredniej reakcji nadwrażliwości. Relacje dawka-odpowiedź i kinetyka uwalniania histaminy i BK-A z leukocytów obwodowych prowokowanych antygenem są podobne. Reakcja BK-A zależy od wapnia i temperatury, wymaga energii metabolicznej i je...

Autologiczne komórki T tworzące rozety jako komórki odpowiedzi w ludzkiej autologicznej reakcji mieszanych limfocytów.

Autologiczne komórki tworzące rozety (komórki tar) mają charakterystykę powierzchniową i funkcjonalną pre-tyktycznych prewitów, a wśród tych cech są pewne, które zostały zidentyfikowane w komórce reakcyjnej autologicznej reakcji mieszanych limfocytów (AMLR). Dlatego też zrobiliśmy AMLR z krążącymi jednojądrzastymi komórkami od normalnych osobników, wykorzystując jako odpowiadające komórki albo całkowite komórki T, komórki T zubożone w komórki Tar, albo oczyszczone komórki Tar. Reakcja komórek Tar w AMLR była znacznie większa niż w p...